La ciudad castillo de Fortuna, situada en la costa, es anfitriona de una distintiva cultura centrada alrededor de una única religión. Aquí se encuentra el hogar de la Orden de la Espada, una organización religiosa que adora al Legendario Caballero Oscuro Sparda, demonio que rechazó su linaje y que combatió contra su propia raza en nombre de la humanidad. Como Sparda, la Orden de la Espada ha decretado su deseo de eliminar a todo tipo de demonios y ha establecido una brigada especial de Caballeros Santos para realizar esta causa. Sin embargo, Dante el Caza-Demonios tenía otros planes para el grupo, ya que estos esconden un distinto objetivo.
Nero: Protagonista principal de esta aventura y primera novedad ya que además rompe con la tradición de contar con Dante como protagonista tal y como ocurre en Devil May Cry, Devil May Cry 2 y Devil May Cry 3 (en cuya "Special Edition" podíamos elegir también a Vergil).
Dante: Protagonista de los anteriores juegos e hijo del Legendario Caballero Oscuro Sparda, aparecerá en Fortuna asesinando a varios miembros humanos de la Orden de la Espada dejando ahora en el aire la cuestión de por qué pasa de aniquilar demonios a asesinar humanos. Su aspecto es más maduro que en
los otros Devil May Cry, con barba a medio rasurar y sus clásicas pistolas y espada. Llega a ser controlable en determinados momentos.
Kyrie: Es la joven hermana del líder de los Caballeros Santos (Credo) y la vocalista que canta en el Festival de la Espada. Guarda en su corazón un lugar especial para Nero ya que esta enamorada de éste.
Nero: Nero posee tres armas principales y una secundaria: una espada, un revólver, el Devil
Bringer y una katana.-Red Queen (Reina Roja): fue cedida por la Orden, en su empuñadura se asemeja al manillar de una moto, al girar la empuñadura lanza una propulsión de gran alcance que se convierte en una llamarada a lo largo del borde de la hoja: Se trata del Exceed. La fuerza explosiva de esta propulsión puede sacudir a cualquier ser humano.
-Blue Rose (Rosa Azul): de gran calibre posee 6 disparos, fue modificada por Nero y posee dos cañones que permiten dos disparos simultáneos capaces de atravesar la armadura más sólida. Aunque la Orden piensa que la espada es la única arma verdaderamente honorable y que las armas de fuego son vulgares, hacen una excepción y permiten a Nero ser el único miembro de la Orden para utilizar una de ellas.
-Devil Bringer (Portador del Diablo): es el brazo derecho de Nero, el cual está imbuído de poder demoníaco y tiene habilidades como atraer enemigos, estamparlos contra el suelo, e incluso usarlos como escudo. También se usa en distintos niveles para pasar de unas zonas a otras, activar cuchillas giratorias o parar el tiempo.-Yamato: es la espada del fallecido hermano de Dante, y permite a Nero Desarrollar todo su poder demoníaco (como el Devil Trigger de Dante). Al usar la katana, detrás de Nero sale una sombra azul cian de demonio que imita sus acciones, y esto aumenta su poder considerablemente.
Dante: Dante posee varias armas como en el resto de juegos de Devil May Cry (6 en concreto) y diferentes estilos de combate: Su espada, sus pistolas, su escopeta, una armadura, un maletín (suena extraño ¿verdad?) y algo así como un equipo de ninja. He aquí todo su arsenal:
- Ebony & Ivory: Clasicas armas de dante disponible en las versiones anteriores de DMC.
- Coyote-A: una escopeta recortada que tiene gran potencia pero poca velocidad, no es muy recomendable usarla si no se mejora. La lleva desde Devil may cry 3.
- Gilgamesh:, formada por unos guanteletes de acero y unas botas de lo mismo. Es una arma lenta comparada con Rebellion, pero su potencia es mucho mayor. Además, cada uno de sus ataques se puede cargar paar hacer más daño incluso. Los guanteletes llevan un motor que cuando se carga el ataque comienza a vibrar y soltar vapor y fuego y las botas llevan otro motor giratorio parecido al de los guanteletes. Lo consigue al acabar con el demonio Equidna en el Bosque de las Ruinas. 
- Maletín de Pandora: es un maletín capaz de transformarse en 666 objetos distintos, entre los que se destacan una ballesta, una ametralladora, un bazooka, un lanzacohetes gigante, una torreta de combate, una cuchilla gigante o un destello de luz que elimina a todos los enemigos de la zona (en memoria a los míticos cazafantasmas). Lo consigue al derrotar al demonio Bael en el Castillo Fortuna.
- Lucifer: es un arma para la media distancia. Está representado por una calavera con dos extremidades a modo de guadaña que se sitúa en la espalda de Dante como una mochila. Ésta permite lanzar finas espadas de energía de color rojo brillante, que explotan al cabo de unos segundos, ya sea ensartadas en el enemigo o acumuladas en el aire. Lo consigue al acabar con el demonio Berial.
